换一批摘要目的 建立Caco-2细胞体外吸收模型并对其进行验证,以利于药物吸收转运的研究.方法 Caco-2细胞接种于Transwell 24孔微孔滤膜培养板上,培养3,6,9,12,15,18,21 d,通过观察细胞形态、绘制生长曲线、测定跨膜电阻值(TEER),比较低、中、高细胞浓度(5×104,1×105,2×105·mL-1)对细胞单层完整性的影响,以确定细胞接种密度和培养时间;通过测定荧光黄的跨膜通透性、细胞膜顶侧(AP)、基底侧(BL)及细胞内的碱性磷酸酶活性验证细胞单层通透性和极性分化特征.结果 低、中、高浓度细胞接种后分别在15,12,9 d形成单层膜结构,吸光度达高峰,但生长后期高、中浓度组细胞出现成团、死亡,且TEER值小于低浓度组.低浓度细胞接种15 d TEER值达到300 Ω·cm2,15~21 d基本稳定;选择低浓度(5×104·mL-1)为合适的浓度接种细胞,培养21 d后,荧光黄的表观渗透系数(Papp)为3.57× 10-7cm·s-1,低于通透实验规定的5.0×10-7cm·s-1;细胞内碱性磷酸酶活性增加,膜两侧碱性磷酸酶活性比值( AP/BL)增高5倍多,细胞形成极性分化.结论 所建立的Caco-2细胞模型完整性、通透性与极性分化特征通过验证,可作为模拟小肠药物转运过程的体外模型.
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关键词
Caco-2细胞吸收,体外跨膜电阻值碱性磷酸酶渗透性Caco-2 cellAbsorption,in vitroTransepithelial electrical resistance ( TEER )Alkaline phosphatesPermeability
分类号
R965（药理学）
栏目名称
DOI
10.3870/j.issn.1004-0781.2018.11.004
发布时间
2018-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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