泊洛沙姆188修饰聚乙烯亚胺作为基因载体的体外评价
In Vitro Evaluation of Poloxamer 188 Modified Polyethyleneimine as Gene Vectors
摘要目的 使用泊洛沙姆 188(P188) 修饰聚乙烯亚胺(PEI) ,评价其作为体外基因载体的相关性质.方法 将 P188 一端的羟基通过碳酸酯法连接在 PEI 的氨基上,得到新的聚合物,通过1 H-NMR 确定新聚合物的结构, 该聚合物与 DNA 形成复合物后,测定复合物的粒径和 Zeta 电位,噻唑蓝(MTT) 法考察复合物对 MCF-7 细胞、 HeLa 细胞、 HepG2 细胞的毒性,使用质粒 pGL3-lus 作为报告基因,测定虫荧光素酶活性评价复合物对 HeLa 细胞的转染效率.结果 1 H-NMR结果表明合成的聚合物具有较高的纯度.复合物的粒径随 N /P 值有减小的趋势; 复合物的 Zeta 电位随 N /P 值的增加而增高.复合物的细胞毒性随着 N /P 值的增加而增大,新聚合物其细胞毒性显著低于未修饰的 PEI.新聚合物在高 N /P值时仍能保持较高的转染效率,特别是 (P188) 1-PEI 其最佳转染效率(N /P = 24) 显著高于 PEI 的最佳转染效率(N /P = 6) .结论 泊洛沙姆 P188 修饰的 PEI 可以作为一种有效的非病毒基因载体转染 Hela 细胞.
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