全脑缺血-再灌注大鼠脑组织中DADLE浓度的测定
Determination of [D-Ala2,D-Leu5] Enkephalin Concentration in Brain Tissues of Rats with Global Cerebral Ischemia Reperfusion
摘要目的 建立快速、准确检测大鼠脑组织中[d-丙氨酸2,d-亮氨酸5]脑啡肽(DADLE)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)定量检测方法.方法 SD大鼠脑组织样品匀浆,乙腈沉淀蛋白,C18反相色谱柱(2.0 mm×50 mm,5 μm)以水-甲醇(0.1%甲酸)体系为流动相,室温下,流速0.4 mL ? min-1,经LC-MS/MS系统进行定量分析.全脑缺血-再灌注模型大鼠分别单次颈静脉注射DADLE 2,5,10 mg · kg-1后,于10,20 min测定脑组织中DADLE浓度.结果 SD大鼠脑组织匀浆液质量浓度在0.1~1000ng · mL-1线性关系良好,定量下限为0.1 ng · mL-1,批内、批间精密度RSD< 11.6%,准确度范围95.81%~99.19%.缺血-再灌注大鼠给药后10 min脑组织DADLE浓度差异不显著,不同剂量给药后20 min脑组织浓度分别为(1.3±0.45),(2.2±1.1),(2.9±1.4) ng·mL-1.结论 该分析方法快速、简单,成功应用于DADLE脑组织样品检测.
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