成骨细胞MC3T3-E1对高重力的力学生物学响应
The mechanical and biological responses of MC3T3-E1 cells under hypergravity
摘要目的 探讨高重力对前成骨细胞MC3T3-E1形态和成骨功能的影响.方法 将MC3T3-E1细胞按不同高重力分为对照组、5 g组、10 g组、15 g组、20 g组,实验组每次加载30 min连续加载3d,对照组同步置于除g值外相同的环境中.鬼笔环肽染色考察细胞骨架蛋白形态;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测试剂盒检测ALP含量;实时定量PCR检测ALP、Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,Col Ⅰ)、骨钙素(osteocalcin,OC)、runt相关转录因子(runt-related transcription factors,Runx2)的基因表达;Western blotting检测Col Ⅰ、OC蛋白表达.结果 高重力条件下成骨细胞胞体变薄,细胞表面积明显增大;细胞骨架排列结构变得疏松、松散,微丝肌动蛋白束状结构减少,微丝呈弥散状,有序性降低.成骨分化相关指标ALP、Col Ⅰ、OC、Runx2的基因均显著上调;Col Ⅰ和OC蛋白亦呈现高表达.对照组茜素红染色只有极少量面积很小的桔红色结节,高重力加载后各组细胞明显形成面积大小不一的桔红色结节.结论 高重力下成骨细胞可通过骨架结构发生重排引起细胞形态的改变,并进一步通过上调分化相关基因和蛋白表达,有效刺激成骨细胞成熟分化.
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