换一批地衣芽孢杆菌2709和 6816碱性蛋白酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及序列分析
CLONING, EXPRESSION AND SEQUENCE ANALYSIS OF THE GENE ENCODING ALKALINE PROTEASE FROM BACILLUS LICHENIFORMIS 2709 AND 6816 IN E.COLI
摘要用PCR方法从地衣芽孢杆菌2709和6816中扩增了碱性蛋白酶基因(apr1和 apr2),扩增的DNA片段插入到大肠杆菌载体pET-28a中,构建成重组分泌型表达载体pAPR1、 pAPR2.pAPR1、 pAPR2中碱性蛋白酶基因在大肠杆菌宿主JM109(DE3)中得到表达.SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量均为30.5×103,同核酸序列测定所推导的值相符.表达产物分别占细胞总蛋白的8.0%和7.5%.2709重组菌所得酶活为1 210 u/mL,6816重组菌所得酶活为1 175 u/mL.研究发现,重组的碱性蛋白酶在进入大肠杆菌周质空间时可能存在前肽自动脱落的现象.同时,对地衣芽孢杆菌2709碱性蛋白酶基因序列进行了测定和比较分析,发现与地衣芽孢杆菌6816碱性蛋白酶基因的同源性为98%. 图5 参11
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医学主题词
蛋白(Egg White)基因(Genes)地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)大肠杆菌(Escherichia coli)序列分析(Sequence Analysis)
DOI
10.3321/j.issn:1006-687X.2002.02.019
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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