换一批
换一批海洋破囊壶菌△~5-延长酶和△~4-脱饱和酶在酿酒酵母中的共表达
Co-expression of Thraustochytrium sp. FJN-10 Δ~5-elongase and Δ~4-desaturase in Saccharomyces cerevisiae
摘要二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA C22:6n-3)是具有各种重要生理功能的高度不饱和脂肪酸.分别以质粒pYTFD5和pYFAD4为模板,扩增获得860 bp的△5-延长酶基因(elo5)和1 600 bp的△4-脱饱和酶基因(fad4).利用重叠延伸PCR构建elo5-fad4融合基因,Hind Ⅲ/Sph Ⅰ双酶切后连接到经同样处理过的pYES2.0载体,构建重组表达质粒pYEL05-FAD4.转化酿酒酵母尿嘧啶缺陷型菌株INVScl,通过缺少尿嘧啶的选择性培养基筛选阳性克隆子.添加外源脂肪酸C20:5底物.半乳糖诱导表达.气相色谱-质谱分析表明,重组酵母总脂肪酸中出现了DHA(二十二碳六烯酸,C22:6n-63)新产物,融合基因elo5-fad4在酿酒酵母中得到了表达.图7表1参18
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分类号
P7
栏目名称
发布时间
2010-03-26
基金项目
国家自然科学基金（30370028;30970047）；
福建省自然科学基金重大项目（2003F005）；
福建省自然科学基金（2008F3036）；
福建省发改委科技产业化项目（[2005]847）；
福建省科技平台（2005Q007）
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