换一批
换一批摘要L-正缬氨酸是合成抗高血压药物培垛普利的重要中间体,其合成主要通过化学方法,具有产品纯度低、环境污染等缺点.提出一种基于多酶介导拆分DL-正缬氨酸结合不对称还原生产高纯度L-正缬氨酸的方法.首先,将混合型DL-正缬氨酸中的D型经过D-氨基酸氧化酶氧化成相应酮酸,然后利用亮氨酸脱氢酶将酮酸不对称还原生成L-正缬氨酸,同时NADH被氧化成NAD+,最后利用甲酸脱氢酶构建NADH循环再生系统.D-正缬氨酸被氧化过程中会产生副产物过氧化氢(H2O2),通过外源添加过氧化氢酶消除该副产物.基于前期最适转化温度、最适转化pH优化基础上,对过氧化氢酶添加量和单次底物添加量进行优化,利用分批补料策略提高L-正缬氨酸产量.结果显示,在最适条件下,L-正缬氨酸产量达到61.09 g/L对映体过量值(e.e.)和转化率分别为99％和96.1％.本研究合成L-正缬氨酸较之化学方法,具有环境污染少、产品纯度高等特点,为制药行业中光学纯L-正缬氨酸的生产提供了一种有效的方法.
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关键词
酶促拆分D-氨基酸氧化酶亮氨酸脱氢酶NADH循环再生系统甲酸脱氢酶L-正缬氨酸enzymatic resolutionD-amino acid oxidaseleucine dehydrogenaseNADH regenerationformate dehydrogenaseL-norvaline
栏目名称
DOI
10.3724/SP.J.1145.2017.01030
发布时间
2018-03-23
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)（2015AA021004）；
江苏省杰出青年基金项目（BK20150002）；
江苏省自然科学基金项目（BK20161292）；
国家自然科学基金项目（31570085）；
中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP51708A)资助 Supported by the High-tech Research and Development Program of China（2015AA021004）；
the Science Fund for Distinguished Young Scholars of Jiangsu Province,China（BK20150002）；
the Natural Science Foundation of Jiangsu Province（BK20161292）；
the National Natural Science Foundation of China（31570085）；
the Fundamental Research Funds for the Central Universities of China（JUSRP51708A）
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