换一批
换一批冠脉内导入重组β-半乳糖苷酶腺病毒的实验研究
Experimental study of intracoronary infusion of recombinant adenovirus coding for β-galactosidase gene
摘要目的:研究经冠状动脉内导入重组β-gal腺病毒后心肌的转染效率,证明冠脉内导入途径是否为重组基因导入心脏的有效的可行的途径.方法:用定向克隆的方法构建重组β-gal腺病毒载体,将1.53×1012 pfu重组β-gal腺病毒经冠状动脉造影导管由左冠状动脉分别导入到7只雄性Yorkshire猪心脏中,于术后1周、2周、4周及8周处死动物,取左右冠状动脉、3～5 mm厚的不同部位的心肌及各实质脏器标本,经1.25%戊二醛固定20 min,用PBS洗涤3次,在室温下用X-gal染液染色16～24 h,脱水、石蜡包埋、切片及HE复染,光镜下计算出表达β-gal的心肌细胞百分数即为转染效率.结果:经冠状动脉内导入重组基因后,于术后1周即有β-gal表达,2周达高峰,心肌细胞的转染效率高达45.57%,全层左冠状动脉壁、心肌间质中均有β-gal表达,4周β-gal表达下降,8周β-gal恢复至对照组的基线水平.结论:经冠状动脉内导入重组腺病毒,心肌细胞及冠脉壁重组基因表达效率高,说明冠状动脉内导入重组目的基因将是冠心病基因治疗中有效的可行的方法.
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