日本血吸虫尾蚴高表达基因LAMP检测方法初探
Detection of Highly Expressed Genes in Schitosoma Japonicum Cercaria by Using Loop-mediated isothermal Amplification: a Preliminary Study
摘要目的:应用LAMP方法对日本血吸虫尾蚴阶段高表达基因簇进行初步检测,为群体的血吸虫早期预警提供参考.方法:选择日本血吸虫尾蚴期高表达基因,利用在线软件PrimerExplorer V4设计目的基因引物.纯水室温孵育感染性钉螺,收集尾蚴,并提取尾蚴和钉螺基因组DNA,用LAMP方法检测尾蚴和感染性钉螺期日本血吸虫的基因表达情况.结果:在所选择的16个基因中,CNUS0000102858.1、CNUS0000103598.1、CNUS0000103614.1等8个蛋白编码基因的LAMP检测尾蚴DNA结果为阳性;CNUS0000038.1、CNUS0000102858.1、CNUS0000103614.1等8个蛋白编码基因的LAMP扩增感染性钉螺DNA结果为阳性.其中,LAMP检测尾蚴及感染性钉螺基因组DNA结果均为阳性的基因有CNUS0000102858.1、CNUS0000103598.1、CNUS0000103614.1、CNUS0000105798.1、CNUS0000106268.1、CNUS0000106483.1、CNUS0000107429.1.结论:在16个备选基因中,这7个尾蚴及感染性钉螺基因组DNA检测结果均为阳性的基因,可考虑作为钉螺及疫水样本LAMP检测基因,为日本血吸虫流行病学调查和群体早期预警提供实验数据.
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