NSUN2对阿霉素诱导H9C2细胞损伤的作用及机制

Effect and Mechanism of NSUN2 on Doxorubicin-induced Damage in H9C2 Cells

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摘要目的:探讨NSUN2 对阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导H9C2 细胞损伤的作用及可能机制.方法:H9C2细胞分两组,对照组(加入 0.9%氯化钠溶液 2 μL)和DOX组(加入用 0.9%氯化钠溶液配置成 0.5 mg/mL阿霉素 2 μL、siNSUN2 转染H9C2 细胞、腺病毒转染人源NSUN2 建立NSUN2 稳定过表达H9C2 细胞系,加入阿霉素 500 ng/mL共培养 24h后,用DCFH-DA探针、Western blot、免疫荧光、TUNEL染色等方法检测细胞的活性氧(ROS)、凋亡及NSUN2 的变化,ELISA检测细胞培养基上清内NSUN2 表达变化.结果:Western blot结果显示,DOX组与对照组比较,H9C2 细胞Bax蛋白水平及NSUN2 表达水平升高(P＜0.01),Bcl-2 蛋白水平下降(P＜0.01);ELISA检测细胞培养液内NSUN2 表达水平DOX组较对照组升高(P＜0.05);TUNEL结果显示DOX组细胞凋亡明显增加;DCFH-DA探针检测DOX组细胞内ROS水平较对照组明显升高;H9C2 细胞敲减NSUN2 后,DOX组细胞内Bax蛋白水平较对照组升高(P＜0.01),Bcl-2 蛋白表达水平下降(P＜0.01);NSUN2 过表达时,DOX组与对照组比较,细胞内Bax表达水平下降(P＜0.01),Bcl-2 表达水平升高(P＜0.01).结论:NSUN2 能抑制阿霉素诱导的H9C2 细胞损伤,对其H9C2 细胞起保护作用,机制可能与NSUN2 抗氧化应激相关.