摘要目的:通过研究体外培养的人视网膜色素上皮细胞(RPE)在人工模拟的缺氧和高糖环境中VEGF165及VEGF165b表达的情况,探讨VEGF165、VEGF165b在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中的作用及相互之间的关系.方法:正常接种并体外培养人视网膜色素上皮细胞,150 μmol/L CoCl2 和 25 mmol/L葡萄糖分别模拟细胞缺氧和高糖环境,将接种细胞分为正常组、缺氧组、高糖组、联合组共 4 组.每组分别于 12、24、36、48 h提取RNA和蛋白,RT-PCR法和Western Blot法检测四组RPE细胞VEGF165、VEGF165b的mRNA和蛋白相对表达量,比较缺氧和高糖环境下VEGF165和VEGF165b在人视网膜色素上皮细胞的表达及关系.结果:⑴缺氧和高糖环境下RPE细胞分裂增殖受限,细胞活力降低.⑵VEGF165及VEGF165b mRNA和蛋白的表达情况:在缺氧模型建立后 12h各组细胞间的表达差异无统计学意义,而 24、36、48 h时各组细胞的表达差异有统计学意义,其中VEGF165 mRNA和蛋白在缺氧组、高糖组、联合组的表达随时间变化而逐渐增加且均高于同一时间的正常组,而VEGF165b mRNA和蛋白的表达则随时间变化而逐渐减少且均低于同一时间的正常组,差异均有统计学意义(P均＜0.05).⑶联合组的VEGF165 mRNA和蛋白表达较缺氧组、高糖组表达增加更多,缺氧组与高糖组比较只在 24h时间点差异有统计学意义;而联合组的VEGF165b mRNA和蛋白的表达较缺氧组、高糖组的表达降低更多,缺氧组与高糖组比较差异无统计学意义.结论:体外培养RPE细胞能够正常表达VEGF165b,缺氧和高糖在转录水平诱导VEGF165 mRNA和蛋白的表达上调,同时降低VEGF165b mRNA和蛋白的表达量.将促血管生成的VEGF165转换为抑制血管生成的VEGF165b将有望成为DR的治疗新思路.