摘要目的:探讨槲皮素(quercetin,Que)对过氧化氢(H2O2)诱导的人类肝实质细胞(L-O2细胞)铁死亡的保护作用及其潜在机制.方法:通过H2O2诱导构建L-O2细胞铁死亡模型,实验分为对照组、H2O2处理组、不同浓度Que处理组以及铁死亡抑制剂Fer-1组.采用CCK-8法测定细胞存活率,荧光显微镜观察细胞内亚铁离子和ROS含量,检测线粒体膜电位的变化,Western blot法检测Nrf2、HO-1、NQO1和GPX4蛋白的表达.使用Nrf2抑制剂ML385抑制Nrf2表达,CCK-8法测定细胞存活率,RT-qPCR检测ACSL4和PTGS2 mRNA水平,显微镜下观察ML385对Que改善H2O2诱导所致细胞损伤(存活率降低、细胞形态和数量异常,以及线粒体膜电位下降)的影响.利用siRNA沉默Nrf2,RT-qPCR评估沉默Nrf2对铁死亡相关基因表达的影响以及对Que抑制H2O2诱导的铁死亡的影响.结果:Que显著减轻了 H2O2诱导的L-O2细胞存活率下降、亚铁离子及ROS含量增加、线粒体膜电位降低.Western blot分析显示,Que能够显著逆转H2O2处理导致的L-O2细胞中Nrf2、HO-1、NQO1和GPX4蛋白表达下调的趋势.ML385显著抑制Nrf2的蛋白和mRNA水平,同时使PTGS2的mRNA水平显著上升,还逆转了 Que对细胞存活率、形态和数量的改善作用,以及对线粒体膜电位的恢复作用.沉默L-O2细胞中的Nrf2后,ACSL4和PTGS2的mRNA水平显著升高.Que可显著抑制H2O2刺激下ACSL4和PTGS2 mRNA水平的升高,沉默Nrf2后,这一抑制作用被显著逆转.结论:Que通过激活Nrf2/GPX4信号通路显著抑制H2O2诱导的L-O2细胞铁死亡.