特异性表达于附睾的核糖核酸梅酶A超家族成员人类核糖核酸酶9是一种新的精子结合蛋白
Human ribonuclease 9, a member of ribonuclease A superfamily,specifically expressed in epididymis, is a novel sperm-binding protein
摘要为研究人类核糖核酸酶99(Rnase 9)的功能,我们构建了哺乳动物融合表达载体pcDNA-hRNase9,通过HEK293T细胞制备了人类核糖核酸酶9-His融合蛋白,并测定了该蛋白的N-端氨基酸序列.根据确定的成熟蛋白,通过E.coli制备了重组Rnase 9蛋白,检测了其核糖核酸酶活性和抗菌活性,采用间接免疫荧光技术分析了人类核糖核酸酶9蛋白在成年人体组织的表达以及在射出精子、体外获能精子表面的定位.结果显示Rnase 9蛋白对面包酵母tRNA缺乏核糖核酸酶活性,而对E coli XLIBlue具有杀菌作用,并表现出剂量依赖和时间依赖的方式.间接免疫荧光法证实Rnase 9蛋白在成体附睾组织大量表达,而在检测的其他成体组织没有表达,在射出精子和体外获能精子的表面则集中分布于整个头部和颈部.这些结果表明Rnase 9蛋白可能在男性生殖道的宿主防御中发挥重要作用.
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