红花2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶基因的克隆及表达分析

Cloning and expression analysis of MPBQ MT gene in safflower

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摘要目的克隆红花维生素E合成相关关键酶2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQ MT)基因,并进行生物信息学及表达分析,为红花维生素E生物合成及调控机制研究奠定基础.方法根据红花种子转录组数据库中得到的中间序列,采用RT-PCR和RACE方法从红花种子中克隆MPBQ MT基因序列,通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,构建MPBQMT与相关物种MPBQ MT的系统进化树,利用RT-PCR方法分析在红花种子不同发育时期MPBQ MT基因的表达量.结果 MPBQ MT基因全长1 392 bp,命名为CtMPBQ MT,具有完整的开放阅读框(ORF),共1 038 bp,编码345个氨基酸.生物信息学分析显示,该基因编码的蛋白理论相对分子质量约为38 900.保守结构域预测表明,该基因编码的蛋白具有典型的SAM蛋白功能结构域.结合其他物种的MPBQ MT基因构建系统树表明,红花MPBQ MT基因与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其中与向日葵和生菜同源性高达89％和86％.实时荧光定量PCR分析表明,MPBQ MT基因在红花开花后50 d的种子中表达量最高.结论成功地对MPBQ MT基因进行克隆及表达分析,为红花维生素E合成及调控机制研究奠定基础.

作者代斯宁 ^[1] 王文玲 ^[2] 韩怡来 ^[1] 齐冬梅 ^[1] 顾天瑶 ^[1] 崔琪 ^[1] 官丽莉 ^[3] 李海燕 ^[3] 李校堃 ^[4] 学术成果认领

作者单位吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,吉林长春,130118 ^[1] 吉林中粮生化有限公司,吉林长春,130118 ^[2] 吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,吉林长春130118;吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130118 ^[3] 吉林农业大学生命科学学院,吉林长春,130118 ^[4]

关键词 2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶 RACE 实时荧光定量PCR 红花维生素E 2-methy-6-phytyl-1,4-benzoquinone methyltransferase RACE real-time PCR Carthamus tinctorius L.vitamin E

主题词红花(Carthamus tinctorius)基因(Genes)苯(Benzene)肿瘤转移(Neoplasm Metastasis)荧光(Fluorescence)

分类号 R282.12

栏目名称 药材与资源

DOI 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.18.019

发布时间 2015-11-23