颠茄精氨酸脱羧酶基因的克隆与表达分析

Cloning and expression analysis on arginine decarboxylase genes in Atropa belladonna

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摘要目的克隆颠茄Atropa belladonna精氨酸脱羧酶(arginine decarboxylase,ADC)基因并进行生物信息学、组织表达谱和诱导谱分析.方法以颠茄总RNA反转录的cDNA为模板,采用RACE技术克隆颠茄ADC基因的全长cDNA序列,利用BLAST和PBIL等在线工具进行生物信息学分析,采用实时定量PCR(qRT-PCR)技术对ADC基因进行组织表达谱和诱导谱分析.结果克隆到2个ADC基因,分别命名为AbADC1(登录号KT802752)和AbADC2(登录号KT802751).AbADC1基因cDNA全长为2 817 bp,编码712个氨基酸残基;AbADC2基因cDNA全长为2 992 bp,编码715个氨基酸残基.蛋白质序列比对表明,AbADC1与马铃薯Solanum tuberosum ADC的相似性较高,为89％;AbADC2与曼陀罗Datura stramonium ADC的相似性较高,为90％.qRT-PCR检测结果表明,AbADC1在须根中的表达量最高,而AbADC2在主根中的表达量最高;AbADC1和AbADC2均不受盐胁迫响应,AbADC2受低温胁迫响应.结论首次克隆并获得了2条颠茄ADC基因全长序列,为进一步研究颠茄托品烷类生物碱的代谢合成奠定了基础.

作者王中平 ^[1] 秦白富 ^[2] 强玮 ^[1] 邱飞 ^[1] 侯艳玲 ^[1] 陈敏 ^[3] 兰小中 ^[4] 廖志华 ^[1] 学术成果认领

作者单位西南大学生命科学学院三峡库区教育部生态环境教育部重点实验室,重庆400715;西南大学西藏农牧学院药用植物联合研发中心,重庆400715 ^[1] 中山大学生命科学学院,广东广州,510275 ^[2] 西南大学药学学院,重庆,400715 ^[3] 西藏大学农牧学院,西藏林芝,850000 ^[4]

关键词颠茄精氨酸脱羧酶基因表达托品烷类生物碱总RNA cDNA Atropa belladonna L.arginine decarboxylase gene expression tropane alkaloids total RNA cDNA

主题词颠茄(Atropa belladonna)精氨酸(Arginine)基因(Genes)脱羧(Decarboxylation)碱类(Alkalies)

分类号 R282.12

栏目名称 药材与资源

DOI 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.15.023

发布时间 2016-09-22