换一批钩藤碱增强自噬改善TNF-α介导的血管内皮细胞血栓前状态的研究
Study on rhynchophylline reducing vascular endothelial cells prethrombotic state induced by TNF-α through enhancing autophagy
摘要目的 基于细胞自噬探讨钩藤碱对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤时血栓前状态的影响.方法 采用TNF-α诱导HUVECs制备损伤模型,透射电镜和免疫荧光技术观察HUVECs自噬水平的变化,Western blotting法检测自噬标记蛋白人微管相关蛋白轻链3Ⅱ (LC3Ⅱ) /LC3Ⅰ、Beclin-1、p62和凝血相关因子核转录因子-κB(NF-κB)、血管假性血友病因子(vWF)和纤溶酶原活化物抑制剂-1(PAI-1)的蛋白表达水平,ELISA法检测细胞培养上清中前列环素(PGI2)和内皮素-1(ET-1)的量.结果 TNF-α上调了HUVECs中凝血相关因子NF-κB、vWF、PAI-1蛋白的表达水平,降低了细胞培养上清液中ET-1和PGI2的量(P＜0.05),使细胞中出现自噬小体,上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平,下调p62蛋白表达水平(P＜0.05);钩藤碱能够促进HUVECs中自噬小体的产生,并在一定程度上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平,下调p62蛋白表达水平(P＜0.05),下调凝血相关因子NF-κB、vWF、PAI-1蛋白的表达水平,上调细胞培养上清液中ET-1和PGI2的量(P＜0.05);自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)能够抑制钩藤碱的作用效果(P＜0.05).结论 钩藤碱能够通过增强自噬降低TNF-α介导的HUVECs细胞凝血相关因子的表达,抑制血管内皮炎性损伤时血栓前状态的发生.
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关键词
钩藤碱肿瘤坏死因子-α细胞自噬人脐静脉内皮细胞血栓前状态rhynchophyllinetumor necrosis factor alphaautophagyhuman umbilical vein endothelial cellsprethrombotic state
分类号
R285.5
栏目名称
DOI
10.7501/j.issn.0253-2670.2017.24.026
发布时间
2018-02-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金资助项目（81473653）
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