换一批内生真菌链格孢菌醋酸乙酯提取物对大肠杆菌抑菌机制的研究
Antibacterial mechanisms of endophytic fungi Alternaria alternata of ethyl acetate extract on Escherichia coli
摘要目的 研究分离白药用植物白毛蛇Humata tyermanni的内生真菌链格孢菌发酵产物醋酸乙酯提取物(B06e)对大肠杆菌的抑菌机制.方法 采用倍比稀释法测定了B06e对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC);测定了B06e作用前后大肠杆菌培养液电导率、核酸和蛋白质的变化;结合流式细胞仪、扫描电子显微镜、凝胶阻滞实验、圆二色谱和荧光实时定量PCR的分析方法研究了B06e对大肠杆菌细胞膜结构、形态、DNA的影响.结果 B06e对大肠杆菌的MIC为25 μg/rnL,3×MIC处理组的电导率是对照组的1.01倍;3×MIC处理组的β-半乳糖苷酶活性是对照组的11.6倍;流式细胞仪分析表明3×MIC处理组被碘化丙啶(PI)染色的阳性细胞比是对照组的286.5倍;扫描电子显微镜结果显示,B06e处理后菌体表面变得粗糙,细胞膜大量塌陷;以上结果说明B06e能增大细胞膜的通透性,破坏细胞膜的完整性.凝胶阻滞、圆二色谱的结果表明,B06e能够以嵌插的方式与DNA结合,但不能降解DNA;实时定量PCR结果表明,经B06e处理后recA和recN基因的表达量分别是对照组的2.9和3.7倍,说明B06e能破坏DNA的结构,迫使大肠杆菌启动了SOS修复.结论 B06e通过破坏大肠杆菌细胞膜完整性和DNA的结构,使得细菌代谢紊乱,最终导致细菌丧失了生长繁殖的能力.
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关键词
大肠杆菌白毛蛇内生真菌链格孢菌抗菌机制细胞膜通透性细胞膜结构DNA损伤Escherichia coliHumata tyermanniendophytic fungusAlternaria spp.antibacterial mechanismcell membrane permeabilitycell membrane structureDNA damage
分类号
R285.5（中药学）
栏目名称
DOI
10.7501/j.issn.0253-2670.2018.02.017
发布时间
2018-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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