重楼总皂苷对LiCl诱导人胃癌MKN-45细胞迁移及侵袭的影响

Effects and mechanism of Rhizoma Paridis total saponin on invasion and migration abilities of human gastric adenocarcinoma cell MKN-45 induced by LiCl

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摘要目的探讨重楼总皂苷(Rhizoma Paridis total saponin,RPTS)在体外对人胃癌MKN-45细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,探讨其作用的可能机制.方法体外培养MKN-45细胞,取对数生长期细胞,加入不同质量浓度RPTS (2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 μg/mL)处理24 h,采用MTT法检测细胞增殖情况;细胞划痕实验、Transwell小室实验检测RPTS对MKN-45细胞迁移和侵袭的影响;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测RPTS对LiCl诱导的MKN-45细胞上清液中基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)的上调表达的影响;免疫印迹技术(Western blotting)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分别检测RPTS(10、20、40 μg/mL)对LiCl诱导的MKN-45细胞中肿瘤侵袭转移相关分子血管内皮生长因子(VEGF)、环加氧酶-2(COX-2)以及LiCl作用靶点糖原合酶激酶-3β (GSK-3β)蛋白和基因表达水平的影响.结果与对照组比较,RPTS 5.0、10.0、20.0、40.0 μg/mL可明显下调MKN-45细胞的增殖活性(P＜0.05、0.001);RPTS 2.5、5.0、10.0 μg/mL可抑制MKN-45细胞的迁移和侵袭能力(P＜0.01、0.001).与模型组比较,RPTS能够显著下调LiC1诱导的MKN-45细胞上清液中MMP-9的表达水平(P＜0.05、0.01);下调细胞中VEGF、COX-2 mRNA和蛋白表达水平;上调LiC1作用位点GSK-3β mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05、0.001).结论 RPTS具有体外抑制MKN-45细胞迁移和侵袭的能力,其作用机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关.