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荔枝核总黄酮调控Skp2-p21/p53信号轴抑制非小细胞肺癌的增殖和转移

Total flavonoids from Litchi Semen inhibit proliferation and metastasis of non-small cell lung cancer by regulating Skp2-p21/p53 signaling axis

摘要目的 探讨荔枝核Litchi Semen总黄酮(total flavonoids from Litchi Semen,TFLS)抑制非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的作用及其潜在的分子机制.方法 TFLS作用于NSCLC细胞后,采用CCK-8法、平板克隆形成实验、Wound healing和Transwell实验分别考察细胞的增殖、迁移及侵袭能力.网络药理学方法预测TFLS中可能发挥作用的活性成分、作用靶点及相关作用通路;流式细胞术检测TFLS对A549细胞周期和凋亡的影响;Western blotting检测转移、周期以及凋亡相关蛋白的表达情况.分子对接技术预测TFLS靶向细胞周期S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)治疗 NSCLC 的潜在活性成分.药物亲和反应的靶点稳定性(drug affinity responsive target stability,DARTS)实验进一步检测槲皮素、表儿茶素与Skp2的结合作用.结果 TFLS可显著抑制NSCLC细胞H1437、H358、A549和H1299的体外增殖及A549细胞的克隆形成能力(P<0.05);TFLS可抑制A549细胞的迁移(P<0.05、0.01)和侵袭(P<0.01),上调上皮钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)的表达(P<0.05),下调波形蛋白(Vimentin)的表达(P<0.01).TFLS可使A549细胞阻滞在G2/M期并诱导其凋亡(P<0.05),下调细胞周期蛋白B1(CyclinB1)表达(P<0.05),上调细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21)和裂解的多聚ADP核糖聚合酶(cleaved poly ADP-ribose polymerase,cleaved PARP)的表达(P<0.05、0.01).网络药理学预测得到的核心靶点为 Skp2、p53,Western blotting结果表明TFLS可以下调Skp2蛋白的表达(P<0.01)以及上调p53蛋白的表达(P<0.05).分子对接和DARTS结果表明,TFLS中的槲皮素、表儿茶素与Skp2有较好的结合能力.结论 TFLS在体外可以抑制NSCLC的生长和转移,诱导A549细胞凋亡,阻滞细胞在G2/M期,减弱细胞上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的发生,其分子机制可能与调控Skp2-p21/p53信号轴有关.槲皮素和表儿茶素可能是TFLS靶向Skp2发挥作用的效应物质.

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作者 任红 [1] 李小兰 [2] 蒋琳 [1] 韩瑶瑶 [2] 廖韵诺 [2] 付杰军 [3] 郭宏伟 [2] 学术成果认领
分类号 R285.5
栏目名称 药理与临床
DOI 10.7501/j.issn.0253-2670.2024.20.011
发布时间 2024-12-06
基金项目
国家自然科学基金 中央引导地方科技发展资金专项 青年岐黄学者培养项目 广西医科大学高水平创新团队 杏湖学者计划
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中草药

中草药

2024年55卷20期

6940-6952页

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