换一批摘要目的 探究灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides中查耳酮合酶LmCHS1基因对黄酮类成分合成的作用.方法 以灰毡毛忍冬叶的cDNA为模板,利用RT-PCR技术克隆得到了 LmCHS1基因开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,并对其基因序列进行生物信息学分析.通过农杆菌侵染的方式,构建本氏烟草瞬时转化体系,对LmCHS1编码蛋白进行亚细胞定位;紫外分光光度法检测烟草叶片及灰毡毛忍冬样品中总黄酮含量;构建原核表达载体,诱导大肠杆菌得到重组蛋白;利用qRT-PCR检测LmCHS1基因在灰毡毛忍冬花、茎和叶中的表达情况.结果 克隆得到的基因长度为1 182 bp,共编码393个氨基酸,分子式为C1914H3070N514O563S17,理论等电点为6.34,属于亲水蛋白.亚细胞定位结果表明LmCHS1蛋白主要定位在细胞质,与大部分物种中具催化黄酮前体合成功能的CHS蛋白的亚细胞定位一致.原核表达得到的重组蛋白,大小为43 000.总黄酮的含量测定结果显示过表达LmCHS1烟草叶片总黄酮含量高于空载组,并具统计学差异.联合表达量和总黄酮含量结果分析发现,LmCHS1表达量与总黄酮含量呈正相关.结论 LmCHS1蛋白定位在细胞质中,正向调控黄酮类物质的合成.
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关键词
灰毡毛忍冬查耳酮合酶原核表达总黄酮功能分析Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.chalcone synthaseprokaryotic expressiontotal flavonoidfunctional analysis
分类号
R286.12（中药学）
栏目名称
DOI
10.7501/j.issn.0253-2670.2025.17.021
发布时间
2025-09-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（82373992）
现代农业产业技术体系（CARS-21）
湖南省中药材产业技术体系专项（HARS-11）
中药资源与开发（湖南省一流专业建设点）
:湖南中医药大学重点学科中药学科(校行发规字号)
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