摘要目的 探讨金丝桃苷对脓毒症相关急性肾损伤(sepsis-associated acute kidney injury,SAKI)小鼠的干预作用及相关机制.方法 采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立SAKI小鼠模型,设置假手术组、模型组、地塞米松(1 mg/kg)组及金丝桃苷高、低剂量(50、25 mg/kg)组和金丝桃苷(50 mg/kg)+核因子E2 相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)抑制剂ML385(30 mg/kg)组.给予药物干预 7 d后,绘制小鼠生存曲线,检测肾功能、炎症因子和氧化应激水平;采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肾组织病理变化;采用TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡情况;免疫组化检测肾组织Nrf2 的表达;Western blotting检测肾组织Nrf2、PTEN诱导激酶 1(PTEN induced kinase 1,Pink1)、Parkin蛋白表达;免疫荧光分析肾组织微管相关蛋白 1 轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)和线粒体外膜转运酶 20 同源物(translocase of the outer mitochondrial membrane 20,TOMM20)的共定位情况.体外采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人肾小管上皮细胞(human kidney-2,HK-2)损伤,给予金丝桃苷干预后,检测细胞活力、凋亡和活性氧水平;透射电镜观察线粒体超微结构;流式细胞仪检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)水平以评估线粒体功能;Western blotting检测Nrf2、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)以及线粒体自噬蛋白Pink1、Parkin、p62的表达.结果 与模型组比较,金丝桃苷可显著提高SAKI小鼠存活率(P＜0.05),减轻体质量下降和肾脏病理损伤(P＜0.05、0.01),改善肾功能和氧化应激反应(P＜0.05、0.01),抑制炎症因子水平(P＜0.05、0.01),上调肾组织Nrf2、Pink1、Parkin的表达(P＜0.01),增加肾组织LC3B与TOMM20的共定位.体外实验结果显示,金丝桃苷(40 μmol/L)可抑制LPS诱导的HK-2细胞凋亡和氧化应激(P＜0.01),提高MMP及ATP水平(P＜0.01),上调Nrf2、HO-1、Pink1、Parkin蛋白表达(P＜0.01),下调p62 的表达(P＜0.01),促进线粒体自噬,缓解线粒体损伤.此外,Nrf2 抑制剂ML385 显著逆转金丝桃苷对CLP诱导的SAKI小鼠的保护作用(P＜0.05、0.01),同时减弱了金丝桃苷诱导的HK-2 细胞线粒体自噬.结论 金丝桃苷可能通过激活Nrf2/HO-1 信号通路调控Pink1/Parkin介导的线粒体自噬,缓解线粒体功能障碍,减轻SAKI小鼠的氧化应激与炎症反应,从而发挥肾脏保护作用.