杏仁中央核-下丘脑室旁核神经环路介导胃俞募配穴针刺调节胃功能机制研究
Involvement of GABAergic projection from central amygdaloid nucleus to paraventricular nucleus of hypothalamus in electroacupuncture induced regulation of gastric function in GAD2-Cre mice
摘要目的:观察杏仁中央核(CeA)γ-氨基丁酸(GABA)能神经元及下丘脑室旁核(PVN)在胃俞募配穴针刺调节胃功能中的作用,基于CeAGABA-PVN环路探讨胃俞募配穴针刺调节胃功能的中枢机制.方法:实验分3 部分进行:第 1 部分选取 C57BL/6 小鼠,随机分为正常组和电针组(电针"中脘"和右侧"胃俞"20 min),每组 6 只,用免疫荧光染色法检测 CeA、PVN 区c-fos 表达;第 2 部分用 GAD2-Cre 小鼠 4 只,在CeA区注射顺行示踪病毒(rAAV-EF1α-DIO-mcherry-WPRE-pA),观察 CeA 中 GABA 能神经元是否投射到PVN 区;第 3 部分选取 GAD2-Cre 小鼠,随机分为空载病毒组(CeA 注射 rAAV-EF1α-DIO-mcherry-WPRE-pA)、化学遗传激活病毒组[CeA注射rAAV-EF1α-DIO-hM3D(Gq)-mcherry-WPRE-pA]、化学遗传激活病毒+电针组[CeA注射rAAV-EF1α-DIO-hM3D(Gq)-mcherry-WPRE-pA+电针"中脘"和右侧"胃俞"20 min],每组 6 只,记录各组小鼠的进食量,检测胃排空率,同时用高效液相色谱法测定 PVN 区 GABA 含量.结果:1)与正常组比较,电针组CeA、PVN区c-fos 表达均明显增加(P<0.01).2)小鼠脑区切片可见病毒在CeA区GABA能神经元胞体大量表达,在 PVN 区可见大量有病毒表达的投射纤维,表明 CeA 中GABA能神经元可投射到PVN区,即CeA到PVN有直接的纤维联系.3)与空载病毒组比较,化学遗传激活病毒组小鼠进食量和胃排空率明显下降(P<0.0 1),PVN 区 GABA 含量明显升高(P<0.0 1);与化学遗传激活病毒组比较,化学遗传激活病毒+电针组进食量和胃排空率明显增加(P<0.0 1),PVN 区 GABA 含量明显下降(P<0.0 1).结论:电针胃俞募配穴对胃功能的调控可通过CeAGABA-PVN环路实现.
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