摘要目的:观察"醒脑开窍"针刺法对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠神经元铁死亡相关蛋白表达的影响,探讨针刺抑制CIRI大鼠神经元铁死亡的作用机制.方法:将雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组和去铁胺(DFO)组,每组18只.采用线栓法制备CIRI大鼠模型,针刺组予针刺"水沟""内关""三阴交",每日针刺2次,每次20 min,连续3 d.DFO组腹腔注射DFO注射液(0.1 g/kg),每日1次,连续3 d.采用Zausinger 6分法评估大鼠神经功能缺损程度;TTC法测定脑梗死体积百分比;HE染色观察脑组织形态结构;透射电子显微镜观察缺血侧海马组织神经元线粒体结构;普鲁士蓝染色观察脑组织铁沉积水平;流式细胞术检测缺血半暗带活性氧(ROS)含量,微板法检测缺血半暗带谷胱甘肽(GSH)含量,实时荧光定量PCR法检测缺血半暗带谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、二价金属转运体1(DMT1)、转铁蛋白(TF)、转铁蛋白受体 1(TFR1)、膜铁转运蛋白 1(FPN1)mRNA表达水平,Western blot法检测缺血半暗带GPX4、DMT1、TF、TFR1、FPN1及铁蛋白(FER)的蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分降低、脑梗死体积增大(P<0.01),脑组织病理损伤严重、铁沉积增多(P<0.01),线粒体呈典型铁死亡改变;GSH含量降低、ROS含量升高(P<0.01),GPX4、FPN1 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01),TF、TFR1、DMT1 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01),FER蛋白表达水平升高(P<0.01).与模型组比较,DFO组和针刺组大鼠神经功能缺损评分升高(P<0.05),脑梗死体积减小(P<0.01),脑组织病理学和线粒体铁死亡改变减轻,铁沉积减少(P<0.01);ROS含量降低、GSH含量升高(P<0.05,P<0.01),DMT1、TF、TFR1 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01),FER蛋白表达水平降低(P<0.05),GPX4、FPN1 mRNA和蛋白表达水平提高(P<0.01).与DFO组比较,针刺组铁离子沉积面积和ROS含量更低、GPX4 mRNA和蛋白表达水平更高(P<0.01,<0.05).结论:"醒脑开窍"针刺法对CIRI大鼠具有神经保护作用,其机制可能与调节缺血半暗带铁死亡相关靶点,调控铁代谢,抑制氧化应激损伤,抑制神经元铁死亡有关.