大鼠增殖抑制基因通过Ras-Raf-MEK-ERK信号通路抑制C6胶质瘤细胞增殖
The inhibiting effects of rHSG on proliferation of malignant C6 cells through inhibiting Ras-Raf-MEK-ERK signal pathway
摘要目的 探讨Ras-Raf-MEK-ERK通路在大鼠增殖抑制基因(rHSG)抑制C6大鼠胶质瘤细胞增殖中的作用.方法 用rHSG过表达腺病毒载体(Adv-rHSG-GFP)转染C6细胞后,流式细胞仪分析腺病毒转染效率;Western blot检测rHSG蛋白表达变化;流式细胞仪分析细胞周期;qRT-PCR检测H-ras、N-ras、K-ras、Erk1、Erk2基因mRNA表达变化;Western blot检测H-ras、N-ras、K-ras、p-Erk1/2、Erk1/2、p-Rb、Rb蛋白表达变化.结果 腺病毒载体能高效的转染C6细胞并表达GFP蛋白,Adv-rHSG-GFP组rHSG蛋白表达显著高于未转染组(PBS)和Adv-GFP组,C6细胞被阻滞于G0/G1期(P<0.01);经IGF-1刺激后,Adv-rHSG-GFP组细胞H-ras、N-ras、K-ras、Erk1、Erk2基因的mRNA和蛋白表达水平与PBS组和Adv-GFP组无明显差异(P>0.05);Adv-rHSG-GFP组细胞过表达rHSG能显著抑制IGF-1诱导的Erk1/2的活化,p-Erk1/2蛋白表达量显著低于其余两组(P<0.01);同时其p-Rb蛋白的表达量显著低于其余两组(P<0.01),而Rb蛋白表达量3组无明显差异(P>0.05).结论 rHSG可能通过抑制Ras-Raf-MEK-ERK信号通路的激活抗C6恶性胶质瘤细胞增殖.
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