RNAi对骨肉瘤MG-63细胞survivin基因表达抑制作用
The gene silencing mediated by RNAi on survivin expression in osteosarcoma cell line MG-63
摘要背景与目的:骨肉瘤是青少年中最常见的恶性肿瘤,它恶性程度高,预后差.survivin基因是作用最强的凋亡抑制因子,其表达与肿瘤的恶性程度及患者预后密切相关.本实验应用RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术研究特异性survivin-siRNA对骨肉瘤MG-63细胞survivin基因表达的干扰作用,并对RNAi技术在骨肉瘤基因治疗领域中应用的可能性进行初步分析.方法:将化学合成的特异性survivin-siRNAl和特异性survivin-siRNA2在脂质体的介导下转染骨肉瘤MG-63细胞,应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和流式细胞术检测转染前后MG-63细胞中survivin-mRNA和蛋白水平,通过四甲基偶氮唑蓝(MTF)法来评估特异性survivin-siRNA对骨肉瘤MG-63细胞的抗增殖作用,观察MG-63细胞生物学特性的改变.结果:特异性survivin-siRNA降低了骨肉瘤MG-63细胞survivin mRNA和蛋白的表达水平,干涉后细胞的增殖受到抑制.结论:化学合成的survivin-siRNA能有效抑制survivin基因在骨肉瘤MG-63细胞中的表达,并对骨肉瘤MG-63细胞增殖有抑制作用.
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