BS69的亚细胞定位及其核输出信号序列的分析鉴定
Cellular localization of BS69 and the identification of its functional nuclear export signal sequence
摘要目的:分析腺病毒E1A相关蛋白BS69不同亚型的DNA序列,寻找新的核输出信号序列,并在Cos7细胞中表达确定其亚细胞定位.方法:分析数据库中不同BS69亚型DNA序列,与传统和输出信号序列比对,寻找可能的新的核输出信号序列.采用DNA重组技术把BS69不同亚型片段的cDNA插入到真核表达载体pcDNA3.1上,转染Cos7细胞,用免疫荧光染色方法确定其亚细胞定位,用Western blotting方法验证不同亚型BS69在细胞中的功能.结果:在BS69亚型2上面发现1段富含亮氨酸的基因序列,与核输出信号序列极为相似.免疫荧光染色方法显示BS69亚型2定位于细胞浆中,而BS69亚型1和2个亚型共同序列编码的蛋白质则定位于细胞核中.BS69亚型2参与了EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein 1,LMP1)介导的信号转导途径.结论:BS69不同亚型具有不同的亚细胞定位,因此具有不同的生物学功能,其中核蛋白是转录调控因子,细胞浆蛋白则可能参与鼻咽癌发生发展的调控.
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