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应用噬菌体展示技术筛选HMGB1启动子结合蛋白

Screening of binding proteins of HMGB1 promoter by phage display technique

摘要目的: 筛选高迁移率族蛋白B1(HMGB1)启动子结合蛋白.方法:应用噬菌体展示技术,以HMGB1启动子DNA作为固相筛选分子,对噬菌体展示环七肽库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"生物筛选,从第4轮洗脱物中随机挑选20个单克隆噬菌体扩增后进行ELISA鉴定.对所筛选克隆进行DNA序列测定和生物信息学分析.结果:经过4轮筛选后,对随机选取的20个噬菌体克隆进行鉴定,其中11个可与HMGB1启动子结合.DNA测序后经过同源性搜索,确定了与HMGB1启动子具有结合作用的蛋白,包括激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)等6种已知功能蛋白和2种未知功能蛋白.结论:筛选到HMGB1启动子的结合蛋白,为研究HMGB1基因的转录调控机制奠定基础.

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中国病理生理杂志

中国病理生理杂志

2010年26卷1期

28-31页

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