换一批C/EBPα参与小鼠胰岛β细胞囊泡谷氨酰胺转运子2基因表达的调控
C/EBPα is involved in transcriptional regulation of mVGLUT2 gene expression
摘要目的: 探讨转录调节因子CCAAT 增强子结合蛋白α(C/EBPα) 在小鼠胰岛β细胞株MIN6的囊泡谷氨酰胺转运子2 (VGLUT2) 基因表达过程中的调控作用.方法: 克隆小鼠VLGUT2基因的启动子区,并对其中C/EBPα的结合位点进行了核酸定点突变,以荧光素酶活力方法观察突变后的启动子活性改变情况.通过电泳迁移率实验(EMSA)检测C/EBPα与含有小鼠VGLUT2启动子区核酸序列的核苷核探针的结合能力, 以CEBPα siRNA特异性抑制转录调控因子C/EBPα的基因表达, 通过荧光素酶, RT-PCR和Western blotting方法观察抑制C/EBPα基因表达后小鼠VGLUT2的基因表达情况.结果: 在对小鼠VGLUT2启动子区C/EBPα结合位点进行核酸定点突变后, 小鼠VGLUT2启动子活性下降约50%, EMSA实验表明C/EBPα可与小鼠VGLUT2启动子区结合, 当以C/EBPα siRNA特异性地下调C/EBPα的表达时, 小鼠VGLUT2的启动子活性、mRNA和蛋白水平也相应各自下降约60%、40%及45%.结论: C/EBPα参与了小鼠VGLUT2的基因表达调控.
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关键词
小鼠β细胞启动子基因表达调控CCAAT增强子结合蛋白α囊泡谷氨酰胺转运子2Mouse pancreatic β cellsPromoterGene expression regulationCCAAT-enhancer-binding protein αVesicular glutamate transporter 2
分类号
R363（病理学）
栏目名称
发布时间
2010-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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