换一批CaMK Ⅱ抑制剂抑制Ang Ⅱ或电场刺激诱导的心肌成纤维细胞TNF-α、TGF-β1及collagen Ⅰ、Ⅲ的表达
Inhibitors of CaMK Ⅱ suppress the expression of TNF-α, TGF-β1 and collagen Ⅰ,Ⅲ in cardiac fibroblasts treated with angiotensin Ⅱ or electrical field stimulation
摘要目的:观察钙-钙调素依赖性蛋白激酶(CaMK)Ⅱ在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)或电场刺激(EFS)诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖、分泌细胞因子及胶原酶表达中的作用及其机制.方法:培养新生1-3 d乳鼠心肌成纤维细胞(3代),分为正常对照组(control)、0.1 μmol/L AngⅡ组、0.1 μmol/L Ang Ⅱ+0.5 μmol/L CaMKⅡ抑制剂KN92组、0.1 μmol/L Ang Ⅱ+0.5 μmol/L CaMKⅡ抑制剂KN93组、0.1 μmol/L Ang Ⅱ+0.5 μmol/L CaMKⅡ抑制剂AIP组;10 V 1.0 Hz EP3组、10 V 1.0 Hz EFS+0.5 μmol/L KN92组、10 V 1.0 Hz EFS+0.5 μmol/L KN93组、10 V 1.0 Hz EFS+0.5 μmol/L AIP组、10 V 1.0 Hz EFS+0.1 μmol/L Ang Ⅱ组.MTT法测定心肌成纤维细胞增殖;ELISA法测定细胞因子(TGF-β1,TNF-α)分泌;RT-PCR检测TGF-β1、TNF-α、collagen Ⅰ、Ⅲ mRNA水平.结果:CaMKⅡ抑制剂(0.5 μmol/L KN93,0.5 μmol/L AIP)能预防Ang Ⅱ或EFS诱导的心肌成纤维细胞增殖;CaMK Ⅱ抑制剂(0.5 μmol/L KN93,0.5 μmol/L AIP)可预防Ang Ⅱ或EFS引起的细胞培养上清液TGF-β1、TNFα含量及相应mRNA表达增加.CaMK Ⅱ抑制剂(0.5 μmol/L AIP,1.0 μmol/L AIP)预防0.1 μmol/L AngⅡ引起的collagen Ⅰ、Ⅲ表达增加.结论:抑制CaMKⅡ对AngⅡ或EFS诱导的心肌成纤维细胞增殖具有预防作用,其机制可能与CaMK Ⅱ抑制剂抑制TGF-β1、TNF-α以及胶原的表达有关.
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