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TCR Vα23-Vβ13基因修饰T细胞及其特异性细胞毒活性研究

Specific cytotoxicity of TCR Vα23-Vβ13 gene-modified T-cells

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摘要目的:分析弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)抗原特异T细胞受体(TCR)Vα23-Vβ13基因修饰T细胞后的体外特异性杀伤活性.方法:扩增并克隆已鉴定的DLBCL患者外周血中单克隆增殖T细胞的TCR Vβ13和TCR Vα23基因全长序列,构建TCR Vβ13-IRES-TCR-Vα23双基因重组质粒,经核转染的方法将其转染正常人T细胞,通过real-time PCR和Western blotting检测TCR Vβ13和TCR Vα23这2个外源基因在mRNA和蛋白水平的体外表达情况,并对TCR转基因T细胞进行体外细胞毒性检测.结果:经酶切分析和核酸序列测定证实重组质粒构建正确,转染正常人T细胞后,TCR Vβ13和TCR Vα23在mRNA及蛋白水平实现了共表达.转染后3 d,TCR转基因T细胞对DLBCL细胞株Toledo细胞的杀伤活性明显高于非特异细胞株Raji细胞和Molt-4细胞,显示出特异性细胞毒活性.结论:成功构建DLBCL相关抗原特异的TCR Vβ13-IRES-TCR Vα23双基因真核表达质粒;TCR基因修饰T细胞可获得特异性细胞毒活性.

作者尹青松 ^[1] 谭获 ^[2] 杨力建 ^[3] 陈少华 ^[3] 查显丰 ^[3] 叶静梅 ^[2] 李扬秋 ^[4] 学术成果认领

作者单位河南省肿瘤医院,河南,郑州,450008;暨南大学,医学院血液病研究所,广东,广州,510632 ^[1] 广州医学院第一附属医院肿瘤血液中心,广东,广州,510260 ^[2] 暨南大学,医学院血液病研究所,广东,广州,510632 ^[3] 暨南大学,医学院血液病研究所,广东,广州,510632;暨南大学,再生医学教育部重点实验室,广东,广州,510632 ^[4]

关键词弥漫大B细胞淋巴瘤 TCR转基因细胞毒活性

医学主题词细胞(Cells)基因(Genes)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)转基因(Transgenes)淋巴瘤(Lymphoma)

分类号 R392.11（医学免疫学）R733.4（造血器及淋巴系肿瘤）

DOI 10.3969/j.issn.1000-4718.2011.02-010

发布时间 2011-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家高技术研究发展计划（863计划）（2006AA02Z114）广东省自然科学基金（05103293,9251063201000001）