换一批
换一批摘要目的:研究二价金属离子转运蛋白1(DMT1)在乳胞素(lactacystin)诱导的SH-SY5Y细胞中的表达改变,从而进一步了解DMT1在帕金森病(PD)神经元损伤中的可能作用机制.方法:建立 lactacystin 损伤的SH-SY5Y细胞模型,用免疫荧光、Western blotting等方法检测细胞DMT1表达水平的变化;在高亚铁环境下,荧光探针DCFH-DA检测胞内氧化应激水平的变化,免疫组织化学法、Western blotting检测胞内α-突触核蛋白(α-SYN)聚合体的改变.结果:Lactacystin处理后,细胞活力呈浓度依赖性降低.与正常对照组相比,lactacystin处理组DMT1表达增加(P＜0.01).正常对照组、lactacystin处理组及Fe2+处理组3组比较,其细胞活力逐渐降低,胞内氧化应激反应逐渐增强,胞浆α-SYN低聚体(43-55 kD)表达量逐渐增多(P＜0.05).结论:Lactacystin诱导SH-SY5Y细胞高表达DMT1,增强细胞摄铁能力,这可能是铁直接或者通过氧化应激反应促进胞内α-SYN的错误折叠和聚集、最终导致PD神经元损伤的关键因素.
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分类号
R363
DOI
10.3969/j.issn.1000-4718.2011.02-026
发布时间
2011-04-07
基金项目
国家自然科学基金
浙江省自然科学基金
浙江省中医药局资助项目
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