ROS／PKC／p38MAPK途径在山茱萸多糖抑制心肌细胞缺氧／复氧损伤的作用

Role of ROS/PKC/p38 MAPK pathway in protective effects of polysac-charide from Fructus corni on rat cardiomyocytes against hypoxia-reoxy-genation injury

二维码有效期 120s

摘要目的：观察山茱萸多糖（ polysaccharide from Fructus corni，PFC）对缺氧／复氧（ hypoxia／reoxygenation， H／R）损伤心肌细胞的保护作用，并探讨其对ROS／PKC／p38 MAPK途径的影响。方法：分离原代乳鼠心肌细胞，建立H／R模型，细胞分为7组：正常对照组（ N组）、缺氧／复氧组（ H／R组）、缺氧／复氧＋PFC （终浓度20 mg／L、100 mg／L和200 mg／L）预处理组、缺氧／复氧＋PFC（100 mg／L）预处理＋蛋白激酶C特异性阻断剂chelerythrine（1μmol／L）组及缺氧／复氧＋PFC（100 mg／L）预处理＋p38 MAPK特异性阻断剂SB203580（10μmol／L）组。倒置显微镜下观察细胞形态和自发搏动频率，Hoechst 33258染色观察细胞凋亡率，酶标仪测定ROS含量、SOD活性及LDH漏出量，免疫印迹法检测PKC、p-p38 MAPK和HSP70的蛋白水平。结果：H／R组细胞活力下降，搏动频率减慢，细胞ROS含量、LDH漏出量、细胞凋亡率及p-p38 MAPK的水平均较N组显著增加（ P＜0.01）。经PFC预处理后，细胞搏动频率、SOD活性及PKC、HSP70的水平较H／R组显著增加（ P＜0.05，），p-p38 MAPK的水平和细胞凋亡率均减少（ P＜0.05），而PFC的保护作用能被chelerythrine或SB203580抑制。结论：山茱萸多糖可抑制心肌细胞缺氧／复氧损伤，其作用可能与增加SOD活性、抑制ROS产生、激活PKC并抑制p38MAPK的过度激活有关。