SSAO介导的氧化脱氨反应对3T3-L1脂肪细胞的氧化应激作用
Effect of deamination reaction mediated by semicarbazide-sensitive amine oxidase on 3 T3-L1 adipocytes
摘要目的:观察氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)催化其底物甲胺(MA)和苯甲胺(BZA)的氧化脱氨反应对成熟3 T3-L1脂肪细胞的氧化应激作用。方法:3 T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞;高效液相色谱法检测不同分化天数下细胞SSAO活性的变化;MTT法检测不同浓度的MA或BZA对细胞活力的影响;荧光探针方法检测细胞在药物作用下产生的活性氧;以0.5 mmol/L MA或BZA处理成熟脂肪细胞或未经诱导分化的前脂肪细胞4 h,观察细胞产生的甲醛( FA)、苯甲醛( BZ)、脂质过氧化指标丙二醛( MDA)、总超氧化物歧化酶( T-SOD)和谷胱甘肽( GSH)的变化。结果:SSAO活性随细胞分化天数的增加而增加,并于第8天达到高峰;不同浓度MA或BZA作用细胞4 h对细胞活力无显著影响( P>0.05);0.5 mmol/L MA或BZA孵育后,细胞产生的活性氧增高,约为阴性对照组的3~4倍,差异有统计学意义( P<0.05);在成熟脂肪细胞中,MDA的含量增加,而T-SOD和GSH的活性和含量减少,与阴性对照组相比,差别有统计学意义( P<0.05);MA和BZA作用未经诱导分化的前脂肪细胞,其MDA和SOD和GSH的变化不明显,差别无统计学意义( P>0.05)。结论:SSAO可能通过其介导的氧化脱氨反应引起3 T3-L1成熟脂肪细胞产生氧化应激。
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