摘要目的:观察类胰蛋白酶( tryptase)对小肠黏膜上皮细胞IEC-6的作用及机制。方法:体外培养IEC-6细胞,随机分为对照(control)组、tryptase处理组、蛋白酶激活受体2(PAR-2)抑制剂(FSLLRY-NH2,FS)处理组以及tryptase+FS处理组。采用MTT法检测细胞生存率;测定分泌的乳酸脱氢酶( LDH)活性;Western blotting测定PAR-2和cleaved-caspase 3的表达。结果:与对照组比,100μg/L和1000μg/L类胰蛋白酶导致细胞生存率明显降低(P<0.05)。与对照组相比,10μg/L到1000μg/L类胰蛋白酶导致LDH的活性明显增加(P<0.05)。与对照组相比,100μg/L和1000μg/L类胰蛋白酶导致细胞的PAR-2及cleaved-caspase 3表达明显升高( P<0.05)。与1000μg/L tryptase处理组比较, FS能够明显增加细胞生存率、降低LDH活性及cleaved-caspase 3表达( P<0.05)。结论:类胰蛋白酶通过激活PAR-2促进IEC-6细胞损伤,且这种损伤呈浓度依赖性。
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