肽基脯氨酰顺反异构酶抑制剂胡桃醌对宫颈鳞癌SiHa细胞凋亡的作用

Pin1 inhibitor juglone induces apoptosis in human cervical cancer SiHa cells

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摘要目的：探讨肽基脯氨酰顺反异构酶抑制剂胡桃醌对宫颈鳞癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响及其促凋亡的机制。方法：选取处于对数生长期的SiHa细胞，将其分为空白对照组和不同剂量（10、20、50、80及100μmol／L）胡桃醌给药组，共6组。采用MTT法观察胡桃醌对SiHa细胞的抑制作用，并计算出半数抑制浓度（ IC50＝20.4μmol／L），依据IC50确定胡桃醌的有效浓度；选取与IC50接近的浓度（20μmol／L）通过Hoechst 33258及流式细胞术测定胡桃醌对SiHa细胞凋亡的影响，Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、8、9以及抑癌基因PTEN的蛋白水平。结果：MTT实验结果显示，与对照组比较，各给药组对细胞活力的抑制作用明显，差异有统计学意义（ P＜0.05）；Hoechst 33258检测表明，20μmol／L胡桃醌处理细胞12 h后可出现明显的细胞核典型凋亡细胞形态，流式细胞术检测结果说明胡桃醌可诱导SiHa细胞出现早期凋亡；Western blot检测显示与正常对照组相比，20μmol／L胡桃醌处理细胞12 h后，cleaved caspase-3、8、9及PTEN的蛋白水平明显增加。结论：胡桃醌可以抑制SiHa细胞的活力，并诱导细胞凋亡，其机制主要是通过抑制caspase途径并增加抑癌基因的表达。