NF-κB 参与枸橼酸铁铵过载诱导的人肝细胞 hepcidin 基因表达

NF-κB participates in hepcidin up-regulation induced by iron overload in HH4 hepatocytes

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摘要目的：研究核因子κB（ NF-κB）在枸橼酸铁铵过载诱导人肝细胞铁调素（ hepcidin）基因表达中的调控作用。方法：依据前期不同浓度枸橼酸铁铵抑制人肝细胞HH4增殖实验结果，选取0.1、1、5和10 mmol／L枸橼酸铁铵处理人肝细胞HH448 h，半定量PCR法检测胞内hepcidin的表达水平；利用染色质免疫共沉淀（ ChIP）、电泳迁移率实验（ EMSA）和双萤光素酶报告基因检测系统，并结合胞内NF-κB活性抑制实验，确定NF-κB对人hepci-din转录活性的影响。结果：5 mmol／L和10 mmol／L浓度的枸橼酸铁铵处理细胞后，hepcidin表达水平显著增强；ChIP和EMSA实验证实NF-κB能够与hepcidin基因启动子结合；重组萤光素酶报告质粒TOPFlash-pHepcidin相对萤光素酶活性明显高于对照组；与重组质粒TOPFlash-pHepcidin相比，突变重组萤光素酶报告质粒TOPFlash-pHep-cidin-mut相对萤光素酶活性显著降低；NF-κB抑制剂BAY 11-7082显著降低了hepcidin基因的表达。结论：NF-κB参与了铁过载诱导的人hepcidin基因表达。这为进一步深入研究肝细胞铁过载模式下多因子协同调控hepcidin基因表达的具体分子机理奠定了基础。