硫化氢保护被 ATP 损伤的 PC12细胞

Protective effect of hydrogen sulfide on PC12 cells injured by ATP

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摘要目的：观察硫化氢的供体硫氢化钠（ NaHS）对三磷酸腺苷（ ATP）诱导的PC12细胞活力、胞内Ca2＋浓度（[Ca2＋]i）及膜通透性的变化，探讨硫化氢神经保护作用的嘌呤信号机制。方法：将对数生长期高分化的PC12细胞，随机分为4组，分别为（1）正常对照组：常规培养，不进行ATP处理；（2）ATP组：接种细胞24 h后ATP处理；（3）NaHS＋ATP组：NaHS预先孵育30 min后再用ATP处理，并且NaHS始终存在于反应体系中；（4）KN-62（P2X7受体阻断剂）＋ATP组：KN-62预先孵育30 min，其余同NaHS＋ATP组。 MTT检测各组细胞活力，Fura-2／AM荧光染料检测各组[ Ca2＋] i ，检测荧光染料YO-PRO-1的相对荧光单位以反映膜的通透性。结果：（1）0.3 mmol／L ATP对细胞活力无影响，但1、3、5、10 mmol／L ATP则呈浓度依赖式明显降低细胞活力，200μmol／L NaHS干预可明显逆转ATP引起的细胞活力下降（ P＜0.05），而800μmol／L NaHS预处理则加剧ATP对PC12细胞的损伤（P＜0.05）。（2）ATP处理PC12细胞会引起[Ca2＋]i 迅速升高并且呈浓度依赖性，NaHS预处理能对抗ATP引起的[Ca2＋]i 升高（P＜0.05）。（3）随着ATP浓度的增加及作用时间的延长，PC12细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加，NaHS预处理可明显减少细胞对YO-PRO-1的摄取（ P＜0.05）。结论：硫化氢可保护ATP损伤的PC12细胞，可能与其抑制[ Ca2＋] i升高和YO-PRO-1荧光增强有关。

作者马洁 ^[1] 沈慧 ^[2] 王璐 ^[3] 宋景贵 ^[4] 韩亚州 ^[5] 李东亮 ^[3] 学术成果认领

作者单位新乡医学院生理学与神经生物学教研室，河南新乡453003; 新乡医学院附属中心医院，河南新乡453003 ^[1] 新乡医学院生理学与神经生物学教研室，河南新乡453003; 新乡医学院第三附属医院，河南新乡453003 ^[2] 新乡医学院生理学与神经生物学教研室,河南新乡,453003 ^[3] 新乡医学院第二附属医院,河南新乡,453003 ^[4] 沁阳市人民医院神经内科,河南沁阳,454550 ^[5]

关键词三磷酸腺苷硫化氢嘌呤P2X7 受体 PC12细胞 Adenosine triphosphate Hydrogen sulfide Purinergic P2X7 receptor PC12 cells

主题词细胞(Cells)硫化氢(Hydrogen Sulfide)创伤和损伤(Wounds and Injuries)荧光(Fluorescence)膜(Membranes)

分类号 R363

栏目名称 论著

DOI 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.07.014

发布时间 2015-08-07

基金项目

国家自然科学基金资助项目( No．81371346 No．81271376) 新乡医学院2013年度研究生科研创新支持计划资助项目