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槲皮素诱导 MCF－7细胞凋亡及其与 Fas／FasL 通路的相关性研究

Quercetin induces MCF-7 cell apoptosis via Fas/FasL pathway

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摘要目的：了解槲皮素诱导人乳腺癌MCF－7细胞凋亡的作用及其与Fas／FasL通路的相关性。方法：建立槲皮素诱导的MCF－7细胞凋亡模型。采用透射电镜观察细胞核形态变化，Annexin V－FITC／PI和JC－1荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位（Δψm ）及FasL中和抗体对细胞凋亡的阻断作用。采用免疫荧光法和流式细胞术检测细胞Fas／FasL的表达。流式细胞术观察p38 MAPK抑制剂SB203580对细胞Fas／FasL表达的影响。 Western blot检测p38 MAPK和p－p38 MAPK蛋白水平的变化。结果：80．0μmol／L槲皮素处理MCF－7细胞48 h，透射电镜可见染色质浓缩及边缘化现象；处理24 h、48 h和72 h，Δψm 分别下降17．4％、44．3％和68．9％，细胞凋亡率分别为（10．2±3．3）％、（28．9±7．5）％和（39．2±8．9）％。 FasL中和抗体预处理细胞后，24 h、48 h和72 h的细胞凋亡率则分别为（8．2±2．8）％、（19．2±5．3）％和（22．5±6．9）％，细胞凋亡阻断率分别为19．6％、33．6％和42．6％。 Fas／FasL表达率随处理时间增加而升高，SB203580可显著抑制细胞Fas／FasL的表达率。 p38 MAPK的蛋白水平变化不大，而p－p38 MAPK的蛋白水平在48 h和72 h显著增高。结论：槲皮素可上调MCF－7细胞的Fas／FasL表达，并经膜Fas／FasL途径诱导MCF－7细胞凋亡，p－p38 MAPK可能是上调Fas／FasL表达的重要信号分子。