换一批
换一批Amiloride 通过抑制缺氧诱导的 NHE1表达而延缓 calpain 介导的 ABCA1降解
Amiloride slows down calpain-mediated ABCA1 degradation through in-hibition of hypoxia-induced NHE1 expression
摘要目的：研究缺氧对钠氢交换体1（NHE1）表达、细胞内钙离子浓度（[Ca2＋]i）和钙蛋白酶（calpain）活性的影响，探讨NHE1抑制剂阿米洛利（ amiloride ）对 ABCA1降解的影响以及与calpain 相关的机制。方法：RAW264．7细胞缺氧0、12、24和48 h。 MTT法检测细胞活力，real－time PCR及Western blot检测NHE1的表达。流式细胞术检测[ Ca2＋] i ，荧光素法检测细胞内calpain活性。进而，经缺氧24 h处理的细胞，cycloheximide干预条件下，NHE1抑制剂amiloride处理6 h及12 h，检测ABCA1蛋白含量。最后，给予calpain抑制剂ALLN及细胞内钙螯合剂BAPTA共孵育12 h，检测ABCA1含量及calpain活性。结果：缺氧呈时间依赖方式抑制细胞增殖。缺氧促进NHE1表达上调，增加[ Ca2＋] i 及calpain活性。缺氧加速ABCA1蛋白降解，而amiloride减缓ABCA1蛋白降解。ALLN及BAPTA升高ABCA1蛋白含量，降低calpain活性。结论：Amiloride延缓calpain介导的ABCA1降解，提示缺氧诱导NHE1表达可能至少部分参与ABCA1蛋白降解。
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关键词
三磷酸腺苷结合盒转运体A1阿米洛利钠氢交换体1钙蛋白酶Adenosine triphosphate-binding cassette transporter A1AmilorideSodium-hydrogen exchanger 1Calpain
栏目名称
? 论 著?
DOI
10.3969/j.issn.1000-4718.2015.11.011
发布时间
2015-12-14
基金项目
国家自然科学基金资助项目
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