褐藻糖胶对RPMI8226细胞血管生成的影响

Effects of fucoidan on angiogenesis of human multiple myeloma RPMI 8226 cells

二维码有效期 120s

摘要目的：探讨褐藻糖胶对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞血管生成的影响及可能的作用机制。方法：体外培养多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞及人血管内皮细胞EA．hy 926细胞，采用MTT法检测褐藻糖胶对RPMI 8226细胞活力的影响；流式细胞术检测细胞周期及凋亡率；ELISA法检测褐藻糖胶处理RPMI 8226细胞后的培养液上清中VEGF的含量；小管形成实验观察褐藻糖胶处理RPMI 8226细胞后的培养液上清对EA．hy 926细胞诱导小管形成能力的影响；Western blot检测HIF－1α、VEGF、p－AKT和p－ERK1／2的蛋白水平。结果：褐藻糖胶对RPMI 8226细胞活力的抑制作用呈浓度及时间依赖性；褐藻糖胶作用RPMI 8226细胞72 h后，细胞周期被阻滞于G1期，细胞凋亡率呈浓度依赖性明显增高，各组均高于对照组（ P＜0．05）；ELISA法结果显示褐藻糖胶处理72 h后的细胞培养液上清中VEGF的含量明显减少，与对照组相比，处理组上清中VEGF的含量下降（ P＜0．05）；内皮细胞形成小管数目与面积随着褐藻糖胶的浓度升高而减小，100 mg／L组差异显著（ P＜0．05）；Western blot结果显示HIF－1α、VEGF、p－AKT和p－ERK1／2的蛋白水平与褐藻糖胶浓度呈负相关（P＜0．05）。结论：褐藻糖胶减少骨髓瘤细胞自分泌VEGF，减弱血管内皮细胞形成小管的能力，降低 HIF－1α和VEGF 的蛋白水平，这可能与抑制 AKT 和ERK1／2的磷酸化有关。