换一批抑制囊泡转运对大鼠内皮祖细胞增殖及钙库操纵性钙内流的影响
Influences of vesicular transport inhibition on proliferation and store-operated calcium entry in rat endothelial progenitor cells
摘要目的:研究囊泡转运在大鼠内皮祖细胞(EPCs)增殖及钙库操纵性钙内流(SOCE)调控中的作用.方法:密度梯度离心法分离获取、并用acLDL-DiI和FITC-UEA-I荧光双染鉴定脾源性EPCs.布雷菲德菌素A(BFA)抑制囊泡转运,CCK-8法和实时无标记细胞功能分析仪观察EPCs增殖变化,流式细胞术检测凋亡情况,并检测囊泡转运关键蛋白ADP核糖基化因子GTP酶活化蛋白1(ARFGAP1)的表达.激光共聚焦显微镜观察囊泡转运抑制后SOCE并用Western blot检测SOCC复合体蛋白表达,进一步采用RNA干扰的方式观察囊泡转运对瞬时受体电位通道1(TRPC1)蛋白表达及SOCE的影响.结果:双染鉴定大鼠脾源性EPCs阳性率为82.53%±6.12%.BFA显著抑制EPCs的增殖但对凋亡无明显影响,同时ARFGAP1表达也明显降低,说明EPCs的囊泡转运受到抑制.抑制EPCs囊泡转运显著下调TRPC1的表达,并降低SOCE.siTRPC1使EPCs的SOCE下降,但si-TRPC1预处理并抑制囊泡转运并没有使EPCs的SOCE进一步降低.结论:抑制EPCs的囊泡转运可以抑制EPCs的增殖并通过下调TRPC1的表达降低SOCE水平.
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关键词
内皮祖细胞囊泡转运瞬时受体电位通道1Endothelial progenitor cellsVesicular transportTransient receptor potential channel 1
医学主题词
钙(Calcium)内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells)性(Sex)大鼠(Rats)瞬时受体电位通道(Transient Receptor Potential Channels)
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-4718.2016.04.003
发布时间
2016-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81370211）
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