WNT5B 过表达对人乳腺癌 MCF－7细胞活力及凋亡的影响

Effects of WNT5B over-expression on viability and apoptosis of human breast cancer cell line MCF-7

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摘要目的：检测 WNT5B 在人正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞株中的表达，及过表达 WNT5B 后对人乳腺癌 MCF－7细胞活力及凋亡的影响，探讨 WNT5B 在乳腺癌发生发展中的作用。方法：采用 RT－PCR 法检测正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞中 WNT5B 的 mRNA 表达水平，将 WNT5B 的表达载体 pcDNA3．1／WNT5B 和空白对照载体 pcDNA3．1分别瞬时转染人乳腺癌 MCF－7细胞，通过 real－time PCR 和 Western blotting 法分别在 mRNA 和蛋白水平验证 WNT5B 的表达效率；并通过 CCK－8的方法检测 WNT5B 过表达对人乳腺癌 MCF－7细胞活力的影响，通过流式细胞术分别检测过表达 WNT5B 对 MCF－7细胞周期分布及凋亡比例的影响。结果：与正常乳腺上皮细胞相比， WNT5B 在乳腺癌细胞中低表达；在乳腺癌细胞 MCF－7中转染 WNT5B 表达质粒后，WNT5B 表达上调，差异有统计学显著性（P ＜0．05）；与对照组相比，过表达 WNT5B 后，MCF7细胞的活力明显降低，处于 S 期细胞的量明显增加， G1和 G2／M 期细胞明显减少，且细胞凋亡比例明显增加，差异均有统计学显著性（P ＜0．05）。结论：WNT5B 在乳腺癌细胞中低表达，过表达 WNT5B 可使人乳腺癌细胞 MCF－7阻滞在 S 期，抑制细胞增殖，促进细胞凋亡。