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AGEs 对人主动脉内皮细胞线粒体融合蛋白表达的影响

Effect of AGEs on expression of mitochondrial fusion proteins Mfn1 and Mfn2 in cultured human aortic endothelial cells

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摘要目的：明确晚期糖基化终产物（AGEs）是否可引起内皮细胞线粒体融合蛋白 Mfn1和 Mfn2表达水平的变化。方法： AGEs 用糖基化牛血清白蛋白（AGE－BSA）代替。将购买的原代人主动脉内皮细胞株进行体外扩增、传代、分组，进行 AGEs 干预，分为对照组，不同浓度梯度的 AGEs 干预组（50 mg／L、100 mg／L 和200 mg／L）和干预不同时间组（分别是100 mg／L 的 AGEs 干预人主动脉内皮细胞6 h、12 h、24 h 和48 h）。采用实时荧光定量 PCR方法对 AGEs 干预后的人主动脉内皮细胞 Mfn1和 Mfn2的 mRNA 表达水平进行检测；采用 Western blot 法对 AGEs干预后的人主动脉内皮细胞 Mfn1和 Mfn2的蛋白表达水平进行检测。结果：不同浓度 AGEs 干预人主动脉内皮细胞24 h 可引起 Mfn1和 Mfn2的 mRNA 和蛋白表达水平显著降低；100 mg／L AGEs 干预人主动脉内皮细胞6 h，Mfn1和 Mfn2的 mRNA 和蛋白表达水平与对照组相比无显著变化，而干预12 h、24 h 和48 h 均引起人主动脉内皮细胞Mfn1和 Mfn2的 mRNA 和蛋白表达水平显著降低。结论： AGEs 干预体外培养的人主动脉内皮细胞12 h 后其线粒体融合蛋白 Mfn1和 Mfn2的表达水平降低，提示 AGEs 可能引起内皮细胞线粒体动力学的改变，并可能通过这一途径引起内皮细胞线粒体功能异常，而导致内皮细胞的功能异常。