AT1R-CaN信号通路在乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5蛋白表达调控中的作用

Role of AT1 R-CaN signaling pathway in regulation of Nav1.5 protein ex-pression in hypertrophic ventricular myocytes from neonatal rats

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摘要目的：探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）-钙调神经磷酸酶（CaN）信号通路在乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5 mRNA和蛋白表达调控中的作用。方法：分离1日龄SD乳大鼠心室获心室肌细胞，分为对照（ control ）组、苯肾上腺素（ PE）组、氯沙坦（ Los）＋PE组和环孢素A（ CsA）＋PE组；重组腺病毒shRNA干扰载体介导CaN A亚基β亚型（ CnAβ）基因沉默分为腺病毒空载体（ Ad-Null ）组、Ad-Null ＋PE 组、重组腺病毒CnAβshRNA1（ Ad-CnAβshRNA1）组和Ad-CnAβshRNA1＋PE组。实时荧光定量逆转录PCR检测脑钠尿肽（ BNP）、β-肌球蛋白重链（β-MHC）和Nav1.5的mRNA表达。 Western blot法检测全细胞提取蛋白CnAβ和Nav1.5的表达。结果：PE干预24 h明显增加心室肌细胞蛋白／DNA比值、细胞BNP和β-MHC的mRNA表达以及细胞面积；上调CnAβ蛋白表达，下调Nav1.5蛋白表达。 CsA和Los干预明显抑制PE干预的上述效应。 PE下调Nav1.5的mRNA表达，但Los和CsA不能抑制此种效应。 Ad-CnAβshRNA1沉默乳鼠心室肌细胞CnAβ基因抑制了PE对BNP mRNA的上调作用，抑制了PE对Nav1.5蛋白表达的下调作用。结论： AT1 R-CaN 信号通路参与调控培养的乳鼠肥大心室肌细胞Nav1.5蛋白表达的调控。