咯利普兰通过NF-κB抑制MRP8/14在RAW264.7细胞中促炎性因子的释放
Rolipram represses MRP8/14-induced pro-inflammatory cytokine releases in RAW264.7 cells through NF-κB activation
摘要目的:探讨PDE4抑制剂咯利普兰抑制髓样相关蛋白8/14(MRP8/14)对小鼠巨噬细胞系RAW264.7中促炎性因子释放的刺激作用,并研究核因子κB(NF-κB)在其中的作用.方法:MRP8/14刺激RAW264.7细胞,采用液相芯片技术和实时荧光定量PCR (qPCR)技术分别检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的蛋白和mRNA水平;咯利普兰预处理RAW264.7细胞后,MRP8/14刺激细胞,采用液相芯片技术和qPCR技术分别检测TNF-α和IL-6的蛋白水平和mRNA水平;Western blot法检测NF-κB P65蛋白磷酸化水平;间接免疫荧光法检测RAW264.7细胞内NF-κB P65蛋白核移位情况.结果:液相芯片及qPCR结果显示MRP8/14具有很强的促炎性因子TNF-α和IL-6释放的作用(P<0.01),而咯利普兰可以显著减弱MRP8/14促炎性因子释放的作用(P<0.05).此外,MRP8/14能够诱导NF-κB P65蛋白发生磷酸化,胞核中P65蛋白增加;而咯利普兰显著减弱NF-κB P65蛋白磷酸化(P<0.05).结论:咯利普兰可能通过NF-κB途径显著减弱MRP8/14的促炎作用.
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