Twist通过ERK通路对体外鼻咽癌细胞血管生成的影响

Effect of Twist on angiogenesis of nasopharyngeal cancer cells by regulating ERK signaling pathway

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摘要目的:探讨Twist转录因子通过ERK通路对体外鼻咽癌CNE2细胞血管生成的影响.方法:利用Lipofectamine 2000将Twist基因干扰序列转染入体外培养的鼻咽癌CNE2细胞, 提取细胞条件培养基 (conditionedmedium, CM) , 用CM作用体外人脐静脉内皮细胞 (human umbilical vein endothelial cells, HUVECs) 后, CCK-8检测细胞活力, Transwell小室实验检测细胞侵袭能力, 小管形成实验检验HUVECs体外血管生成能力, real-time PCR检测Twist mRNA在CNE2细胞中的表达, Western blot法检测CNE2细胞中ERK、p-ERK、p38、p-p38、JNK、p-JNK和VEGF的表达.另外, 使用ERK、p38和JNK通路抑制剂作用CNE2细胞后, 再检测通路抑制剂对体外HUVECs小管形成的影响.结果:CNE2细胞转染Twist干扰序列后可显著抑制Twist mRNA及蛋白表达水平;从沉默Twist基因的CNE2细胞提取的CM促进体外HUVECs活力、侵袭和小管形成的能力均明显被削弱;抑制CNE2细胞中Twist的表达可上调p-ERK并下调VEGF的表达 (P <0.01) , 而对p-p38和p-JNK的表达无明显影响;ERK通路抑制剂PD98059可部分削弱Twist干扰序列对体外HUVECs小管形成的抑制作用.结论:沉默Twist基因可显著抑制体外鼻咽癌细胞的促血管生成作用, 该作用可能部分通过上调ERK信号通路实现.