miR-509靶向Rac1调节人肝癌LM3细胞侵袭和迁移及裸鼠模型的存活
miR-509 regulates growth, invasion and migration of human hepatocellu-lar carcinoma LM3 cells and survival of nude mice
摘要目的:探究微小RNA-509(miR-509)对人肝癌细胞生长、侵袭、迁移及荷瘤裸鼠存活的作用及其作用机制.方法:将miR-509模拟物(miR-509 mimic)和pcDNA Ras相关的C3肉毒毒素底物1(pcDNA Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,pcRac1)转染人肝癌LM3细胞,Western blot检测Rac1的表达;萤光素酶报告基因实验证明miR-509和Rac1的靶向关系;Transwell实验检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;采用皮下注射LM3细胞的方法建立肝癌裸鼠移植瘤模型,检测裸鼠存活率,Western blot检测肿瘤组织Rac1的表达.结果:miR-509 mimic能明显抑制LM3细胞Rac1的表达(P<0.05),pcRac1能明显减弱miR-509 mimic对Rac1表达的抑制作用(P<0.05);miR-509 mimic还能显著减弱Rac1野生质粒的萤光素酶活性(P<0.05);同时,miR-509 mimic可减少侵袭细胞数,抑制肝癌细胞迁移(P<0.05).此外,miR-509过表达还能升高肝癌移植瘤模型小鼠存活率(P<0.05),降低肿瘤组织Rac1的蛋白表达水平(P<0.01).结论:miR-509能通过靶向抑制Rac1的表达而抑制肝癌细胞侵袭和迁移,并促进肝癌模型小鼠存活.
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