换一批
换一批慢病毒载体CV072介导的Mfn2过表达抑制肝星状细胞活化
Lentiviral vector CV072-mediated Mfn2 over-expression inhibits hepatic stellate cell activation
摘要目的:构建携带线粒体融合蛋白2(Mfn2)基因的慢病毒载体,并探讨Mfn2过表达对大鼠肝星状细胞活化的抑制作用及其减少肝纤维化相关因子生成的机制.方法:构建含Mfn2的慢病毒过表达载体CV072-pC-MV-Mfn2-EGFP,转染肝星状细胞;荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白的表达及转染效率;RT-qPCR和Western blot法检测转染后细胞中Mfn2的mRNA和蛋白表达水平;Western blot检测Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、α-SMA、TGF-β1、Smad2和Smad3的水平;ELISA检测Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原蛋白水平.结果:与各对照组相比,慢病毒过表达载体CV072-pCMV-Mfn2-EGFP转染后,细胞促凋亡蛋白表达增多,TGF-β1/Smad通路蛋白TGF-β1、p-Smad和p-Smad3的蛋白水平均降低,纤维化相关蛋白 α-SMA、I型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白和IV型胶原蛋白的水平降低(P<0.01).结论:转染慢病毒过表达载体CV072-pCMV-Mfn2-EGFP在体外可有效抑制肝星状细胞活化,并可能通过抑制TGF-β1/Smad通路减少肝纤维化相关因子的生成.
更多相关知识
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1000-4718.2019.06.024
发布时间
2019-07-08
基金项目
浙江省自然科学基金资助项目
- 浏览112
- 被引4
- 下载48
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
