摘要目的:探讨叶酸和维生素B12在同型半胱氨酸(Hcy)通过哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡中的作用及机制.方法:将HUVECs分为3组,分别为对照组(0μmol/L Hcy)、Hcy组(100μmol/L Hcy)和干预组(100μmol/L Hcy+30μmol/L叶酸+30μmol/L维生素B12).细胞处理72 h后,流式细胞术检测HUVECs的凋亡率;荧光倒置显微镜观察DNA甲基转移酶1(DNMT1)过表达腺病毒转染的效率;RT-qPCR和Western blot分别检测MST1及DNMT1的mRNA和蛋白表达水平;巢式甲基化特异性PCR法检测MST1启动子区的甲基化水平.结果:与正常对照组比较,Hcy组HUVECs的凋亡率升高(P<0.01),MST1的mRNA(P<0.01)与蛋白(P<0.05)表达水平明显增加,DNMT1的mRNA水平降低(P<0.01);而叶酸和维生素B12干预可明显抑制Hcy引起的HUVECs凋亡、MST1 mRNA水平升高(P<0.01)及DNMT1 mRNA水平降低(P<0.01),MST1的mRNA水平与HUVECs凋亡率呈正相关(r=0.9439,P<0.001).转染DNMT1过表达腺病毒后,可见HUVECs中大量绿色荧光蛋白表达;同时,DNMT1的mRNA和蛋白表达(P<0.01)以及MST1启动子区的DNA甲基化水平明显增加(P<0.01),而MST1的蛋白水平下降(P<0.01).结论:MST1表达增加可以诱导HU-VECs凋亡,而叶酸和维生素B12在缓解Hcy介导的HUVECs凋亡中发挥重要作用,其保护机制可能是通过上调MST1启动子区DNA甲基化实现的.这将为进一步研究动脉粥样硬化的发病机制提供理论依据.