Rab18通过JAK2/STAT3下调PLIN2并减少THP-1巨噬细胞脂质蓄积

Rab18 down-regulates PLIN2 through JAK2/STAT3 pathway and at?tenuates lipid accumulation in THP-1 macrophages

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摘要目的:研究Rab18是否通过Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路下调脂滴包被蛋白2(PLIN2)表达,并影响人THP-1巨噬细胞脂质蓄积.方法:采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育人THP-1巨噬细胞不同时间(0、6、12和24 h),用Western blot检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,使用油红O染色法观察细胞内脂质蓄积的变化.制备野生型、活化型和失活型Rab18巨噬细胞,予以ox-LDL孵育,Western blot和RT-qPCR检测细胞内Rab18、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞内p-JAK2和p-STAT3的核转位情况.用JAK2抑制剂AG490预处理活化型Rab18细胞,再用ox-LDL孵育该细胞,Western blot和RT-qPCR检测JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3及PLIN2蛋白水平,细胞免疫荧光技术观察巨噬细胞中PLIN2的表达,油红O染色和GPO-PAP酶法观察细胞内脂质蓄积情况及甘油三酯(TG)含量.结果:ox-LDL处理24 h后,Rab18、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3及PLIN2蛋白水平显著升高(P<0.05),脂质蓄积增加.活化型和野生型Rab18上调JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3水平(P<0.05),下调PLIN2蛋白表达(P<0.05),细胞脂质蓄积及TG含量减少;免疫荧光显示Rab18与JAK2和STAT3存在共定位关系,活化型Rab18上调p-JAK2和p-STAT3水平,促进p-STAT3核移位;JAK2抑制剂AG490处理后,PLIN2表达及TG含量显著增加(P<0.05),细胞脂质蓄积增加.结论:Rab18通过JAK2/STAT3信号通路减少PLIN2表达,并抑制人THP-1巨噬细胞脂质蓄积.

作者杨丽 ^[1] 蒋思怦 ^[2] 张荣 ^[1] 郭东铭 ^[3] 张星星 ^[1] 袁中华 ^[1] 学术成果认领

作者单位 南华大学心血管疾病研究所,动脉硬化学湖南省重点实验室,湖南省动脉硬化性疾病国际科技创新合作基地,湖南衡阳421001 ^[1] 南华大学心血管疾病研究所,动脉硬化学湖南省重点实验室,湖南省动脉硬化性疾病国际科技创新合作基地,湖南衡阳421001;四川护理职业学院附属医院,四川省第三人民医院,四川成都610000 ^[2] 南华大学衡阳医学院临床解剖与生殖医学应用研究所,湖南衡阳421001 ^[3]

关键词 Rab18蛋白 Janus激酶2 信号转导及转录激活因子3 脂滴包被蛋白2 脂质蓄积动脉粥样硬化

分类号 R543 R363.2

栏目名称论著

DOI 10.3969/j.issn.1000-4718.2022.05.001

发布时间 2022-06-01

基金项目

国家自然科学基金